目的 分析结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测（Xpert MTB/RIF）、涂片抗酸染色镜检（ACID-fast bacilli smear microscopy, AFB）与γ干扰素释放实验（interferon-gamma release assay, IGRA）3种实验方法诊断结核病的价值及差异。方法收集北京同仁医院2019年1月至2021年3月同时检测Xpert MTB/RIF、AFB以及IGRA的患者1 400例，以中国国家行业标准WS288-2017作为结核病诊断标准，评价3种检测方法及差异。结果 1 400例患者中确诊结核病132例，其中肺结核116例，肺外结核16例。Xpert MTB/RIF阳性107例，灵敏度72.7%,特异性为100%;AFB阳性55例，灵敏度为33.3%,特异性为99.1%;IGRA阳性316例，灵敏度为89.4%,特异性为45.3%。结论 Xpert MTB/RIF特异性最高，灵敏度较高；IGRA灵敏度最高，特异性较低；AFB灵敏度较低，特异性较高，3种方法各有特点，联合使用有助于临床结核病的诊断。