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干扰hsa_circ_0103232对葡萄膜黑色素瘤细胞生物学行为的影响

Effect of interfering hsa_circ_0103232 on the biological behavior of uveal melanoma cells

文献详情

资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院 北京同仁眼科中心 眼内肿瘤诊治研究北京市重点实验室 北京市眼科学与视觉科学重点实验室 医学人工智能研究与验证工信部重点实验室,北京 100730
出处:
ISSN:

关键词: 葡萄膜黑色素瘤 环状RNA 小干扰RNA 治疗靶点

摘要:
目的:探讨干扰hsa_circ_0103232对葡萄膜黑色素瘤C918和MUM2B细胞增殖、迁移、细胞周期及凋亡的影响。方法:培养C918和MUM2B细胞株,通过实时荧光定量PCR分别检测3个靶向hsa_circ_0103232的小干扰RNA(siRNA)的干扰效果,并选择干扰效果最好的siRNA进行后续实验。将C918和MUM2B细胞均分为阴性对照转染(siCtrl)组和干扰(si-hsa_circ_0103232)组,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和细胞克隆形成实验检测细胞增殖情况;采用Transwell实验检测细胞迁移情况;采用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡情况;采用荧光原位杂交实验检测hsa_circ_0103232在细胞中的定位。结果:实时荧光定量PCR结果显示,3个靶向hsa_circ_0103232的siRNA中,以si-hsa_circ_0103232#1的靶点效果最好,在C918和MUM2B细胞中的干扰后表达水平分别为0.263±0.016和0.469±0.028,显著低于对照组的1.013±0.008和1.004±0.108(均 P<0.001)。CCK-8结果显示,与siCtrl组相比,si-hsa_circ_0103232组C918和MUM2B细胞增殖活力在转染后不同时间均显著降低,差异均有统计学意义(均 P<0.05);细胞克隆形成实验结果显示,si-hsa_circ_0103232组C918和MUM2B细胞形成克隆数分别为(12±1)和(45±7)个,分别少于siCtrl组的(28±4)和(83±3)个,差异均有统计学意义( t=4.93、7.42,均 P<0.05);Transwell实验结果显示,si-hsa_circ_0103232组C918和MUM2B细胞迁移数量分别为(4±1)和(24±2)个,分别少于siCtrl组的(37±12)和(57±3)个,差异均有统计学意义( t=3.91、10.80,均 P<0.05);流式细胞术检测结果显示,与siCtrl组相比,si-hsa_circ_0103232组C918和MUM2B细胞中G1期细胞的比例均明显升高、G2/M期比例均显著下降,细胞凋亡率均显著升高,差异均有统计学意义(均 P<0.05);荧光原位杂交实验结果显示,hsa_circ_0103232在C918和MUM2B细胞中定位在细胞核。 结论:干扰hsa_circ_0103232可抑制C918和MUM2B细胞增殖、迁移和周期进程,并促进细胞凋亡。hsa_circ_0103232可能成为葡萄膜黑色素瘤新的治疗靶点。

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院 北京同仁眼科中心 眼内肿瘤诊治研究北京市重点实验室 北京市眼科学与视觉科学重点实验室 医学人工智能研究与验证工信部重点实验室,北京 100730
通讯作者:
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