目的 探究二甲双胍对Bhlhe40表达及破骨细胞分化功能的影响.方法 C57BL/6小鼠(雄性,4周龄)股骨中提取原代骨髓单核细胞,RNA测序分析预测二甲双胍影响破骨细胞分化的相关基因,并通过实时荧光定量PCR验证.诱导原代骨髓单核细胞向破骨细胞分化(OC组),诱导分化的同时加入低浓度二甲双胍药物干预(OC+MET组),免疫荧光激光共聚焦检测对比两组间Bhlhe40表达差异,蛋白免疫印迹试验(Western blot)检测两组间Bhlhe40蛋白表达差异.抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)分析Bhlhe40基因敲除小鼠(Bhlhe40-/-组)与野生型小鼠(WT组)原代骨髓单核细胞经诱导后形成的破骨细胞的面积,Micro-CT对比Bhlhe40-/-组与WT组小鼠股骨的骨量及相关参数,免疫组化染色对比两组股骨远端的TRAP表达量.结果 经RNA测序预测及实时荧光定量PCR验证,诱导原代骨髓单核细胞向破骨细胞分化后Bhlhe40高表达,经二甲双胍干预后,Bhlhe40表达降低.免疫荧光激光共聚焦检测结果可见OC组破骨细胞中Bhlhe40高表达,而OC+MET组中Bhlhe40表达量降低;Western blot结果显示OC+MET组中Bhlhe40蛋白表达明显较OC组下调.TRAP染色结果显示Bhlhe40-/-组破骨细胞面积较WT组减少;Micro-CT结果显示Bhlhe40-/-组小鼠股骨骨小梁增厚,密度升高,骨量增加;免疫组化染色结果显示Bhlhe40-/-组小鼠股骨TRAP阳性细胞数目减少.结论 Bhlhe40调控破骨细胞形成及分化,促进其骨吸收功能,二甲双胍可通过下调Bhlhe40表达抑制破骨细胞分化及其骨吸收能力.