目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶(PI3K/AKT)通路探讨淫羊藿苷对激素性股骨头坏死人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成骨分化能力的影响。方法:体外培养人骨髓间充质干细胞，通过成骨、成脂诱导分化进一步鉴定人骨髓间充质干细胞的分化能力。以地塞米松诱导人骨髓间充质干细胞模型，以0,0.1,0.5,1,5,10,50,100 nmol/L的淫羊藿苷干预24 h后，CCK-8实验筛选出合适的淫羊藿苷浓度进行后续研究(CCK-8法)。将人骨髓间充质干细胞分为对照组、模型组、PI3K激活剂组(10μmol/L 740YP组)、淫羊藿苷组、淫羊藿苷+PI3K抑制剂组(淫羊藿苷+10 mmol/L LY294002组)。CCK-8法检测各组人骨髓间充质干细胞活力；染色法检测人骨髓间充质干细胞的成骨、成脂分化能力；RT-qPCR法检测成骨分化相关基因表达水平；比色法检测碱性磷酸酶(ALP)活性；Western Blot法检测各组人骨髓间充质干细胞中PI3K/AKT通路有关蛋白表达量。结果:第3代人骨髓间充质干细胞生长良好，成骨、成脂诱导分别显示有钙化结节、红色脂滴出现，说明人骨髓间充质干细胞具有成骨和成脂分化的能力。CCK-8法筛选淫羊藿苷的浓度为1 nmol/L用于后续实验。与对照组相比，模型组钙化结节数量、ALP活性、成骨因子(ALP、RUNX2、OPN、BMP2)的基因表达水平以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和Bcl-2蛋白表达水平明显降低，脂滴数量、成脂因子(PPARγ、C/EBPα)的基因表达水平以及Bax蛋白表达水平显著升高，差异有统计学意义(P(0.05);与模型组相比，PI3K激活剂组和淫羊藿苷组钙化结节数量、ALP活性、成骨因子的基因表达水平以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和Bcl-2蛋白表达水平显著升高，脂滴数量、成脂因子的基因表达水平以及Bax蛋白表达水平明显下降，差异有统计学意义(P(0.05);与淫羊藿苷组相比，淫羊藿苷+PI3K抑制剂组钙化结节数量、ALP活性、成骨因子的基因表达水平以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和Bcl-2蛋白表达水平明显降低，脂滴数量、成脂因子的基因表达水平以及Bax蛋白表达水平显著升高，差异有统计学意义(P(0.05)。结论:淫羊藿苷可能通过激活PI3K/AKT通路，进而增强地塞米松诱导的人骨髓间充质干细胞成骨分化能力和细胞活性。