摘要:
目的采用光激化学发光分析(LICA)技术建立快速定量检测人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的方法。方法采用2株配对的HMGB1单克隆抗体(简称单抗),1株单抗包被受体微球,另1株单抗先用生物素标记,再与链霉亲合素的供体微球共同组成人HMGB1的LICA检测方法,进而优化反应体系并对方法的各项性能指标进行评价。分别测定普通肺炎患者(35例)和重症肺炎患者(25例)血清HMGB1的浓度,并与健康体检者(35名)进行比较。结果建立的HMGB1 LICA检测方法的灵敏度为0.1μg/L,线性测量范围为0.1~1 000μg/L;批内和批间精密度分别为1.74%~2.92%和1.93%~3.73%,均低于5%;回收率范围为94.53%~106.37%,平均回收率为99.74%;与酶联免疫吸附测定方法有良好的相关性(r=0.888 2);与HMGB2和HMGB3重组抗原无明显交叉反应,特异性良好。普通肺炎患者和重症肺炎患者血清HMGB1的质量浓度分别为(6.76±3.13)和(19.69±9.04)μg/L,均高于健康体检者[(1.49±0.74)μg/L;t值:-5.447和-5.186,均P(0.01],普通和重症肺炎患者间差异亦有统计学意义(t=-3.500,P(0.01)。结论 LICA法检测HMGB1灵敏度高、特异性强、结果可靠,且具有均相、快速、免清洗等特点,有良好的临床应用前景。