摘要:
目的观察烟酰胺二磷酸腺苷(NADPH)氧化酶的抑制剂能否抑制人晶状体上皮细胞增殖,探讨NADPH氧化酶亚单位NOX的同源异构体在人晶状体上皮细胞mRNA的表达情况。设计实验性研究。研究对象人晶状体上皮细胞永生系(SRA01/04)。方法实验分为4组,SRA01/04中加入表皮生长因子(EGF)(EGF组),加入NADPH氧化酶抑制剂二亚苯基碘(DPI)(DPI组),先后加入DPI和EGF(DPI+EGF组),不加入上述物质为对照组。利用酶标仪和活细胞计数CCK-8试剂盒检测各组人晶状体上皮细胞OD450值。用RT-PCR方法检测NOX的同源异构体在SRA01/04中的表达,将RT-PCR产物测序,利用NCBIBLAST软件对测序结果与cDNA进行序列对比。主要指标人晶状体上皮细胞的OD450值,NOX的同源异构体表达情况及其与人其他组织的序列对比。结果加入CCK-83.5小时后,EGF组比对照组OD450值升高了12.0%(P=0.000);DPI组比对照组OD450值下降了25.5%(P=0.000);DPI+EGF组OD450值比EGF组降低了26.1%(P=0.000)。RT-PCR结果表明,NOX蛋白的5种同源异构体[包括NOX1、NOX2(gp91phox)、NOX3、NOX4、NOX5]的mRNA在SRA01/04中均有表达。人晶状体上皮细胞中的NOX1-5的序列与人其他组织的相似性分别为100%、100%、99.7%、100%、100%。结论NADPH氧化酶可能促进人晶状体上皮细胞的增殖;NOX同源异构体NOX1、NOX2、NOX3、NOX4、NOX5的mRNA在人晶状体上皮细胞SRA01/04中均有表达,其中NOX1明显弱于其他四种NOX。