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防腐剂对兔角结膜上皮细胞毒性及玻璃酸钠保护作用的实验研究

Cellular toxicity of preservatives in corneal and conjunctival epithelial cells and cytoprotective action of sodium hyaluronate

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机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院同仁眼科中心,北京市眼科研究所
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关键词: 防腐剂 羟苯乙酯 山梨酸 苯扎溴铵 玻璃酸钠 角膜上皮细胞 结膜上皮细胞

摘要:
目的 观察玻璃酸钠(sodium hyaluronate,SH)对3种眼科常用防腐剂致兔角膜和结膜上皮细胞毒性的保护作用.方法 体外常规方法培养兔角膜和结膜上皮细胞,将不同浓度防腐剂羟苯乙酯(0.3 g·L-1、0.6 g·L-1和1.2 g·L-1)、山梨酸(1 g·L-1和2 g·L-1)以及苯扎溴铵(0.025 g·L-1、0.05 g·L-1和0.1 g·L-1)分别单独和联合4 g·L-1 SH与培养细胞作用,并于作用后1 h、3 h、5 h,利用LIVE/DEAD细胞活性/毒性检测方法,观察细胞酯酶及细胞膜透通性变化,计算细胞存活率.结果 3种防腐剂与细胞作用不同时间后,角膜和结膜上皮细胞存活率均低于对照组,并且与浓度和作用时间呈依赖关系(P<0.05).其中0.1 g·L-1苯扎溴铵对细胞存活率影响最大,作用1 h后,角膜和结膜上皮细胞存活率均为0;0.3 g·L-1羟苯乙酯影响最小,作用5 h后角膜和结膜上皮细胞存活率分别为(80.89±7.81)%和(55.00±7.81)%;二者相比差异均有统计学意义(P<0.05).各时间点结膜上皮细胞的存活率均低于角膜上皮细胞(P<0.05).在各时间点羟苯乙酯-SH组及山梨酸-SH组,角膜和结膜上皮细胞存活率均高于同浓度防腐剂组(P<0.05).作用3 h后,0.05 g·L-1浓度苯扎溴铵-SH组与同浓度防腐剂组相比,细胞存活率明显增高(P<0.05),其余浓度的苯扎溴铵-SH组与同浓度防腐剂组相比,细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05).结论 3种防腐剂中苯扎溴铵对角结膜的毒性最大,羟苯乙酯毒性最小.3种防腐剂对结膜上皮细胞的毒性作用大于角膜上皮.SH对羟苯乙酯和山梨酸所致细胞毒性均有较好的保护作用,但其保护作用随防腐剂作用时间的增加而减弱.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院同仁眼科中心,北京市眼科研究所
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