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自然杀伤T细胞结膜下注射防治大鼠角膜移植免疫排斥反应的初步研究

The effects of conjunctival injection with NKT cells on inhibiting rat corneal transplantation rejection

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机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院眼科中心,北京市眼科研究所
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关键词: 自然杀伤T细胞 角膜移植 免疫耐受

摘要:
目的 探讨自然杀伤T细胞(NKT)对大鼠角膜移植免疫排斥反应的防治作用.设计实验性研究.研究对象 8只Fisher344大鼠为供体,16只Lewis大鼠为受体.方法 无菌取Lewis大鼠脾脏中淋巴细胞,RPMI1640培养基体外培养三周后,流式细胞仪分选出NKT细胞(浓度5×104 /ml).取8只Fisher344大鼠为供体,16只Lewis大鼠为受体行穿透性角膜移植术.将受体大鼠随机分为治疗组和对照组,每组各8只.治疗组在手术结束时结膜下注射0.1ml上述浓度的NKT细胞,对照组注射相同体积生理盐水.术后观察记录植片的存活情况,术后第10天,每组2只大鼠取材,行组织病理学、免疫组织化学和流式细胞仪检测.主要指标角膜植片平均存活时间,组织病理学及免疫组织化学染色检查淋巴细胞浸润情况.结果 对照组角膜植片平均存活时间为(8.00±1.58)天,NKT细胞治疗组为(26.00±1.34)天.组织病理学检查可见对照组大鼠角膜植片重度水肿,角膜基质纤维板层排列紊乱,大量炎性细胞浸润,新生血管长入植片.而治疗组植片仅表现为轻度水肿,少量炎性细胞浸润.免疫组织化学染色可见对照组植片中大量CD4+和CD8+淋巴细胞浸润,治疗组中仅见少量CD4+和CD8+淋巴细胞浸润.流式细胞仪检查结果表明在治疗组脾脏中NKT细胞为(3.90±0.32)%,明显高于对照组(1.85±0.21)%;外周血中治疗组NKT细胞为(1.34±0.12)%,对照组为(3.59±0.23)%.结论 NKT细胞结膜下注射可延长角膜移植片存活时间,为防治角膜移植免疫排斥反应提供新的思路.

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第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院眼科中心,北京市眼科研究所
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