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文章类型：
机构：
[1]首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科,北京,100730
临床科室
耳鼻咽喉-头颈外科
外科
首都医科大学附属北京同仁医院
首都医科大学附属同仁医院
头颈外科
[2]北京市耳鼻咽喉科研究所,北京,100005
临床科室
耳鼻咽喉-头颈外科
研究所
耳鼻咽喉科研究所
首都医科大学附属北京同仁医院
首都医科大学附属同仁医院
咽喉科
[3]首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科,北京,100730;北京市耳鼻咽喉科研究所,北京,100005
临床科室
耳鼻咽喉-头颈外科
外科
研究所
耳鼻咽喉科研究所
首都医科大学附属北京同仁医院
首都医科大学附属同仁医院
头颈外科
咽喉科
出处：
ISSN：
关键词：
抗药性
多药
喉肿瘤
RNA干扰
慢病毒属
遗传载体
摘要：
目的 构建并鉴定表达MDR-1小干扰RNA的慢病毒载体系统并检测其对于喉癌多药耐药细胞系(LSC-1/TAX)多药耐药表型的逆转效果.方法 根据MDR-1基因序列,设计3条寡聚核苷酸序列,合成互补DNA链,插入慢病毒表达质粒pLVTHM中,与pCMV-dR8.74和pMD2G共转染293T细胞,包装产生病毒颗粒.以RT-PCR、realtime PCR及Western blot方法检测三条siRNA在人喉癌耐药细胞系(LSC-1/TAX)中的干扰效率,并采用MTT方法检测干扰前后化疗药物的敏感性.结果 通过酶切和测序证实慢病毒载体构建正确,产生能够表达GFP和siRNA的慢病毒颗粒,浓缩滴度为＞1×108TU/ml.三条siRNA均可以感染LSC-1/TAX细胞系,其中第三条siRNA敲减效果最佳.结论 成功建立逆转MDR-1小干扰RNA的慢病毒载体系统,为逆转喉癌多药耐药表型的实验奠定了基础.
基金：
国家自然科学基金;耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室资助
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科,北京,100730
推荐引用方式(GB/T 7714)：
钟琦,黄志刚,房居高,等.逆转mdr-1小干扰rna的慢病毒载体系统的构建和鉴定[J].中国耳鼻咽喉头颈外科.2007,14(9):505-509.
