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EBV/lipoplex介导IL-12基因在体外及小鼠鼻黏膜内的表达

EBV/lipoplex-mediated IL-12 exogenous gene expression in COS-7 cells in vitro and in murine nasal mucosa

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收录情况: ◇ 北大核心

机构: [1]首都医科大学附属北京市同仁医院耳鼻咽喉头颈外科 [2]北京市耳鼻咽喉科研究所
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关键词: 白细胞介素12 基因治疗 鼻炎 变应性 常年性

摘要:
目的体外扩增鉴定EBV质粒-pGEG.m IL1 2,与阳离子脂质体混合物形成EBV/lipoplex.用EBV/lipoplex转染COS-7细胞和小鼠鼻黏膜后检测mIL12的表达.方法体外扩增鉴定pGEG.m IL-12;EBV/lipoplex转染COS-7细胞,用SYBR Green I核酸荧光染色观察质粒转染情况,ELISA法检测培养上清液mIL12p70表达.经鼻滴入EBV/lipoplex,原位杂交和免疫组化方法分别观察小鼠鼻黏膜内IL-12 mRNA和p70蛋白的表达情况.结果 EBV/lipoplex能够高效转染COS-7细胞,分泌IL-1 2活性蛋白.EBV/lipoplex转染细胞的培养上清液中IL-12含量明显高于对照组细胞培养上清液,上清液中IL-12含量明显高于细胞裂解液.EBV/lipoplex经鼻滴入后能够在小鼠鼻黏膜内高效表达IL-12 mRNA和p70活性蛋白.结论鼻腔给药系统-EBV/lipoplex能够成功转染COS-7细胞和小鼠鼻黏膜上皮细胞,并且高效率表达IL-12分泌性蛋白,是变应性鼻炎基因治疗的一个高效基因转移方法.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京市同仁医院耳鼻咽喉头颈外科
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