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本发明涉及一种丝状真菌质谱鉴定蛋白提取方法，包括用75％乙醇灭活洗脱丝状真菌的菌丝；再用磁珠加上合适比例的甲酸和乙腈结合旋涡震荡充分乳化和碾磨其细胞壁；最后用超声波超声破碎细胞，从而有利于真菌蛋白的完全析出，即可用于质谱的鉴定。通过这样富集提取的蛋白纯度和产量较高，可以使得大多数临床常见丝状真菌如曲霉菌属、暗色真菌、接合菌属、镰刀菌属、尖端赛多孢子菌、双相真菌的质谱鉴定到种的水平。
主权项：
1.丝状真菌质谱鉴定蛋白提取技术，包括以下步骤：(1)液体沙保弱培养基垂直旋转培养临床丝状真菌，直至培养出足够多的丝状真菌，静止10分钟，待其沉淀；(2)弃上清培养液，收集1.5ml的沉淀转移至离心管中，13000转/分钟离心2分钟，弃上清；再用75％的乙醇1ml 13000转/分钟离心灭活洗脱3分钟；重复用75％的乙醇1ml洗脱沉淀2次，待沉淀充分干燥；(3)沉淀中加入等量的0.1mm磁珠，视沉淀多少加入20～100μL的70％甲酸水溶液，要求加入的甲酸水溶液没过沉淀，充分研磨，漩涡震荡混匀作用5分钟；(4)再加入等体积的乙腈溶液，充分研磨，漩涡震荡混匀作用5分钟；(5)超声波超声破碎2分钟；(6)13000转/分钟离心2分钟，吸取1μL上清液添加到质谱仪靶板上，并在室温下自然晾干；(7)在步骤(6)晾干的上清液靶点位置上覆盖1μL HCCA基质溶液并在室温下自然晾干，即可上机质谱鉴定。
