资源类型:
申请人:
青岛大学
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首都医科大学附属北京同仁医院
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当前专利权人:
青岛大学
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首都医科大学附属北京同仁医院
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申请号:
申请日期:
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摘要:
本发明提供了一种用于诱导性多能干细胞定向分化小梁网细胞的培养体系,所述培养体系包括第一阶段诱导分化培养基和第二阶段诱导分化培养基;所述第一阶段诱导分化培养基由基本培养基添加TGF‑beta1、NGF‑bet和Erythropoietin制备得到;所述第二阶段诱导分化培养基由基本培养基添加TGF‑beta1、NGF‑beta、Erythropoietin、PGF2alpha和EGF制备得到;所述基本培养基为含血清替代品的MEM‑alpha培养基。通过定向诱导分化培养体系诱导分化的细胞与原代小梁网细胞极其相似,满足了干细胞治疗青光眼的临床要求;同时该培养体系中不存在外来物种以及同种其他个体的“污染”,是一种稳定、有效且不存在污染的定向诱导分化体系。
主权项:
1.一种用于诱导性多能干细胞(iPSCs)定向分化小梁网细胞的培养体系,其特征在于,所述培养体系包括第一阶段诱导分化培养基和第二阶段诱导分化培养基;所述第一阶段诱导分化培养基由基本培养基添加转化生长因子-β(TGF-beta)、神经生长因子-β(NGF-bet)和红细胞生成素(Erythropoietin)制备得到;其中,TGF-beta、NGF-bet和Erythropoietin的添加量分别为2ng/ml、100ng/ml和2U/ml;所述第二阶段诱导分化培养基由基本培养基添加转化生长因子-β(TGF-beta)、神经生长因子-β(NGF-beta)、红细胞生成素(Erythropoietin)、前列腺素F2α(PGF2alpha)和表皮细胞生长因子(EGF)制备得到;其中,TGF-beta、NGF-beta、Erythropoietin、PGF2alpha和EGF的添加量分别为2ng/ml、100ng/ml、2U/ml、1μM和10ng/ml;所述基本培养基为含血清替代品(knockoutserumreplacement)的MEM-alpha培养基;其中,knockoutserumreplacement的含量为10%。