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本发明涉及一种基于小鼠泪腺诱导的干燥综合征小鼠模型的造模方法，本发明通过提取小鼠的泪腺匀浆制成抗原与弗氏佐剂混合为乳化剂，使用该乳化剂对同种小鼠进行多点注射，使小鼠发生自身免疫反应，产生干燥综合征小鼠模型。本发明首次使用小鼠泪腺作为抗原，相比现有采用小鼠下颌腺的诱导造模方法，本发明的造模方法诱导小鼠出现干燥综合征相关全身症状的同时，眼部及泪腺症状更为明显，因而更适合于干燥综合征相关干眼的基础研究。
主权项：
1.一种基于小鼠泪腺诱导的干燥综合征小鼠模型的造模方法，其特征在于，通过提取小鼠的泪腺匀浆制成抗原与弗氏佐剂混合为乳化剂，使用该乳化剂对同种小鼠进行多点注射，使小鼠发生自身免疫反应，产生干燥综合征小鼠模型；所述造模方法包括： S1:将7-9周龄小鼠脱颈椎处死，取出双侧眶外泪腺，显微镜下剥离包膜及结缔组织，用PBS 缓冲液洗净后放入离心管中，冰上制备组织匀浆以及超声粉碎后离心取上清液，测上清液的蛋白浓度，以上清液为抗原；所述小鼠为雌性或雄性C57BL/6N 小鼠； S2：根据上清液蛋白浓度的高低，用PBS 缓冲液稀释调整，再与等量的FCA与混合，分别得到抗原终浓度为4mg/mL和2mg/mL的乳化剂； S3:将7-9周龄的同种小鼠随机分为模型组和对照组，测量正常小鼠的泪液分泌量和唾液分泌量的基线水平； S4:分别在第0 天、第7 天于模型组多点注射4mg/mL的乳化剂，注射量为0.1mL/只，在第14天于再次多点注射2mg/mL的乳化剂，注射量为0.1mL/只；对照组小鼠同时期同位置等量注射PBS 缓冲液；所述多点注射为颈部皮下注射或颈部皮内多点注射； S5:造模6 周后，检测指标，筛选造模成功小鼠； 造模成功的检测指标包括如下： 饮水量：从造模前一周开始，每周测定小鼠饮水量；模型组小鼠饮水量逐渐上升； 泪液分泌量：造模前测正常小鼠的泪液分泌量的基线水平，造模后模型组小鼠泪液分泌量下降到基线以下； 唾液分泌量：造模前测正常小鼠的泪液分泌量的基线水平，造模后模型组小鼠唾液分泌量下降到基线以下； 角膜荧光素钠染色：造模后模型组小鼠角膜上皮着染面积较对照组增大； 血清抗SSA 抗体浓度：造模后模型组小鼠的血清中抗SSA 抗体浓度高于对照组； 泪腺组织及唾液腺组织的病理学检测：造模后模型组小鼠泪腺结构 较对照组紊乱，导管附近出现淋巴细胞浸润； 泪腺组织炎症因子mRNA 水平检测：造模后模型组小鼠泪腺炎性因子mRNA 表达水平高于对照组小鼠。
