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摘要:
本发明的涉及一种自身免疫性视网膜病变动物模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将重组小鼠Recoverin蛋白,按1‑3mg/ml的量加入到等体积含有4mg热灭活结核分支杆菌H37Ra的不完全氟式佐剂中,在0‑4℃下用匀浆机在8000‑10000rpm/min速度下混匀1‑2h,再反复抽吸到5ml注射器中,直至混匀成乳液状且乳液不分散;(2)取8只7‑9周C57BL/6雄性或雌性小鼠,随机均分为两组:实验组:在小鼠上方背部皮下,按含有重组recoverin蛋白200‑300μg/只小鼠的量注射步骤(1)制备得到的乳液,免疫第0天及第2天在小鼠腹腔,按200ng/只小鼠的量注射百日咳(PTX);对照组:不注射含有重组recoverin蛋白及热灭活结核分支杆菌H37Ra的不完全氟式佐剂乳液;(3)观察第3‑8周的实验组和对照组的小鼠,用于验证小胶质细胞活化介导自身免疫性视网膜病变的机制。
主权项:
1.一种自身免疫性视网膜病变动物模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将重组小鼠Recoverin蛋白,按1-3mg/ml的量加入到等体积含有4mg热灭活结核分支杆菌H37Ra的不完全氟式佐剂中,在0-4℃下用匀浆机在8000-10000rpm/min速度下混匀1-2h,再反复抽吸到5ml注射器中,直至混匀成乳液状且乳液不分散;(2)取8只7-9周C57BL/6雄性或雌性小鼠,随机均分为两组:实验组:在小鼠上方背部皮下,按含有重组recoverin蛋白200-300μg/只小鼠的量注射步骤(1)制备得到的乳液,免疫第0天及第2天在小鼠腹腔,按200ng/只小鼠的量注射百日咳(PTX);对照组:不注射含有重组recoverin蛋白及热灭活结核分支杆菌H37Ra的不完全氟式佐剂乳液;(3)对第3-8周的实验组和对照组的小鼠,检测活体视网膜病变、视网膜功能及小胶质细胞的活化情况指标,用于验证小胶质细胞活化介导自身免疫性视网膜病变的机制;步骤(3)中所述活体视网膜病变、视网膜功能指标包括视网膜组织学变化、外周血recoverin抗体生成、视网膜小胶质细胞活化指标。