目的 借助网络药理学、分子对接技术及体外细胞实验探讨黄连素治疗非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的潜在作用机制，为临床用药提供理论依据。方法 借助中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）获取黄连素的吸收、分布、代谢和排泄（ADME）特征性信息，采用毒物基因组学数据库（CTD）、人类基因综合数据库（GeneCards）筛选黄连素靶点基因及NASH相关基因，并借助Bioinformatics工具获得基因交集；采用Cytoscape v3.6.1软件构建“黄连素-目标基因-通路”网络，进行基因互作网络分析、功能富集分析，以确定黄连素治疗NASH的关键基因。使用webina分子对接技术评估黄连素与关键基因靶点的结合能力。取对数生长期的小鼠正常肝细胞（AML12），分为空白组、模型组和黄连素各剂量组，各组给予相应干预，实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测验证相关作用靶点。结果 黄连素治疗NASH的关键基因有白介素-10（IL-10）、前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）、血红素加氧酶1（HMOX1）、CC趋化因子配体2（CCL2）、重组人白介素8（CXCL8）、Toll样受体4（TLR4）、JUN原癌基因（JUN）、基质金属蛋白酶9（MMP9）、肿瘤坏死因子（TNF）、白介素-6（IL-6）等，分子对接结果表明黄连素与TLR4、CCL2、MMP9、CXCL8蛋白具有良好的结合性能。体外细胞实验结果表明，与空白组比较，模型组PTGS2、CCL2和TLR4 mRNA表达升高（P＜0.01）；与模型组比较，黄连素各剂量组PTGS2、CCL2和TLR4 mRNA表达降低（P＜0.01），呈现剂量依赖趋势。结论 黄连素可以靶向调控NASH发生发展过程中的关键分子构成的网络，进而发挥系统药理作用。