目的:探讨微RNA-146a（miR-146a）对核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3（NLRP3）的调节作用及其在呼吸机所致肺损伤（VILI）中的作用及其机制。方法:① MLE-12细胞按照随机数字表法分成3组（每组3孔）：机械牵张（CS）0 h组、CS 2 h组、CS 4 h组，分别进行幅度为20%、频率为0.5 Hz的CS 0、2、4 h。② MLE-12细胞按照随机数字表法分为4组（每组3孔）：Negative control（NC）对照组（NC+CS 0 h组）、miR-146a过表达组（Mimic+CS 0 h组）、NC+CS 4 h组、miR-146a过表达+CS 4 h组（Mimic+CS 4 h组），分别转染序列NC或miR-146a-5p Mimic后进行CS 0或4 h。③ MLE-12细胞按照随机数字表法分成4组（每组3孔）：微RNA Inhibitor N.C.（N.C.）对照组（N.C.+CS 0 h组）、miR-146a抑制组（Inhibitor+CS 0 h组）、N.C.+CS 4 h组、miR-146a抑制+CS 4 h组（Inhibitor+CS 4 h组），分别转染N.C.或miR-146a-5p Inhibitor后进行CS 0或4 h。④ MLE-12细胞按照随机数字表法分成8组（每组3孔）：对照组（NC组）、miR-146a过表达组（Mimic组）、自噬溶酶体途径抑制剂组（NC+CQ组）、miR-146a过表达+自噬溶酶体途径抑制剂组（Mimic+CQ组）、泛素蛋白酶体抑制剂组（NC+MG132组）、miR-146a过表达+泛素蛋白酶体抑制剂组（Mimic+MG132组）、蛋白合成酶抑制剂组（NC+CHX组）、miR-146a过表达+蛋白合成酶抑制剂组（Mimic+CHX组），分别转染序列NC或miR-146a-5p Mimic后加入自噬溶酶体途径抑制剂氯喹（CQ）、泛素蛋白酶体抑制剂MG132或蛋白合成酶抑制剂放线菌酮（CHX）。免疫印迹法（Western blot）检测上皮钙黏素（E-cadherin）、闭合蛋白（Occludin）、NLRP3蛋白水平，实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-146a水平。结果:①与CS 0 h组比较，CS 2 h组和CS 4 h组miR-146a、E-cadherin、Occludin水平较低，NLRP3蛋白水平较高（均 P<0.05）；与CS 2 h组比较，CS 4 h组miR-146a、E-cadherin、Occludin蛋白水平较低，NLRP3蛋白水平较高（均 P<0.05）。②与NC+CS 0 h组比较，NC+CS 4 h组NLRP3蛋白水平较高，E-cadherin及Occludin水平较低（均 P<0.05）；Mimic+CS 0 h组NLRP3蛋白水平较低（ P<0.05）。与NC+CS 4 h组比较，Mimic+CS 4 h组NLRP3蛋白水平较低，E-cadherin及Occludin水平较高（均 P<0.05）。③与N.C.+CS 0 h组比较，N.C.+CS 4 h组和Inhibitor+CS 0 h组NLRP3蛋白水平较高，E-cadherin及Occludin水平较低（均 P<0.05）。与N.C.+CS 4 h组比较，Inhibitor+CS 4 h组NLRP3蛋白水平较高，E-cadherin及Occludin水平较低（均 P<0.05）。④与NC组比较，Mimic组和NC+CHX组NLRP3蛋白水平较低（ P<0.05），NC+CQ组与NC+MG132组NLRP3蛋白水平差异无统计学意义（均 P>0.05）；与Mimic组比较，Mimic+CHX组NLRP3蛋白水平较高（ P<0.05），Mimic+CQ组与Mimic+MG132组NLRP3蛋白水平差异无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:CS后miR-146a水平降低、NLRP3水平增加，激活炎症反应导致上皮屏障相关的连接蛋白E-cadherin及Occludin降解形成VILI；miR-146a可能经蛋白合成途径抑制NLRP3表达减轻炎症反应，从而缓解VILI。