目的 调查上海市多家三级医院重症监护病房（ICU）环境中碳青霉烯类耐药革兰阴性菌（CRGNB）污染现状,发现潜在的污染源,为ICU多重耐药菌的医院感染防控提供依据。方法 2024年12月—2025年1月使用mSuperCARBA显色培养基对ICU内CRGNB患者周边及公共区域环境物表进行采样并菌株分离,采用MALDI-TOF质谱仪对目标菌进行鉴定。结果 本次调查共采样653份,细菌培养阳性点位76份,CRGNB检出点位60份,CRGNB检出率为9.19%。CRGNB水源性组检出率53.40%,非水源性组检出率0.91%,差异有统计学意义（χ2=286.450,P(0.001）;17株CRKP全基因组测序结果显示,多位点序列（ST）分型主要为ST11和ST15两大类,分别携带2～12种耐药基因。结论 上海市15家三级医院ICU多个环境点位检测出CRGNB,其中CRKP检出率最高。ICU高频接触的物表CRGNB定植率较低,而水槽排水孔存在CRGNB的医院感染传播风险。CRGNB患者脸盆毛巾很难做到彻底清洁、消毒、干燥,污染率较高。