目的:探索牙龈卟啉单胞菌（Pg）在诱导血管内皮细胞铁死亡中的作用，并预测潜在的Hub基因。方法:首先，采用Pg（W83）刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC）4 h，使用透射电镜观察铁死亡相关的形态学特征。随后，提取Pg刺激前后HUVEC的RNA进行转录物组测序，分析差异表达基因（DEG）是否富集于铁死亡，并对铁死亡相关DEG（Fer-DEG）进行基因本体（GO）功能分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析、蛋白互作（PPI）网络构建及Hub基因预测。基于转录组结果，采用Pg-脂多糖（LPS）刺激HUVEC 24 h，检测铁死亡指标，包括使用细胞增殖/毒性检测试剂盒检测细胞存活率；使用2，7-二氯荧光素二乙酸酯探针检测活性氧；使用试剂盒检测Fe2?、脂质过氧化物（LPO）、丙二醛及还原型/氧化型谷胱甘肽比值（GSH/GSSG）；使用JC-1探针检测线粒体膜电位；使用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测溶质载体家族7成员11（SLC7A11）、溶质载体家族3成员2（SLC3A2）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX4）的表达。最后，采用RT-qPCR验证，LPS刺激HUVEC 24 h后，Hub基因肿瘤坏死因子（TNF）或TNF-α、白细胞介素（IL）-6和前列腺素内过氧化物合成酶2（PTGS2）的表达情况。结果:Pg刺激后HUVEC线粒体变小、线粒体脊减少。Pg感染组和对照组HUVEC的DEG富集于铁死亡；DEG中共包含56个Fer-DEG，GO功能分析和KEGG富集分析显示它们分别富集于TNF应答、LPS应答、生物刺激应答等和TNF通路、C型凝集素受体通路、IL-17通路等；在上述56个基因构成的PPI网络中，TNF、IL-6和PTGS2为预测的Hub基因，它们显著关联至铁死亡调控相关通路，包括不饱和脂肪酸生物合成、活性氧代谢调控等。LPS组HUVEC存活率［（66.77±1.80）%］显著低于对照组［（100.00±1.44）%］，而LPS+Fer-1组HUVEC存活率［（84.50±1.47）%］显著高于LPS组（均 P<0.05）；LPS组的活性氧荧光信号强度（1 523.00±250.70）显著高于对照组（328.20±38.68），LPS+Fer-1组荧光信号强度（753.30±67.11）显著低于LPS组（均 P<0.05）；LPS组的Fe2?、LPO、丙二醛含量［分别为（29.83±4.25）μmol/10 6个细胞、（3.58±0.24）μmol/gprot、（5.54±0.33）μmol/gprot］均显著高于对照组［分别为（7.29±0.79）μmol/10 6个细胞、（1.08±0.05）μmol/gprot、（2.06±0.17）μmol/gprot］和LPS+Fer-1组［分别为（16.33±1.63）μmol/10 6个细胞、（2.01±0.09）μmol/gprot、（3.24±0.26）μmol/gprot］（均 P<0.05），且LPS组的GSH/GSSG（2.17±0.08）显著低于对照组（6.96±0.20）和LPS+Fer-1组（4.31±0.81）（均 P<0.05）。LPS组的JC-1聚合体/单体荧光信号强度（0.46±0.07）显著低于对照组（285.60±160.40），而Fer-1预处理（1.53±0.17）可显著改善LPS导致的荧光信号强度降低（均 P<0.05）。LPS组的SLC7A11、SLC3A2、GPX4蛋白表达水平和mRNA表达水平均显著低于对照组（均 P<0.05），且均显著低于Fer-1+LPS组（均 P<0.05）。LPS组中TNF、IL-6及PTGS2的mRNA表达水平均显著高于对照组，而LPS+Fer-1组3种因子的表达均显著低于LPS组（均 P<0.05）。 结论:Pg可诱发血管内皮细胞铁死亡，TNF、IL-6和PTGS2可能是潜在的Hub基因。