目的观察乳腺癌MCF-7细胞在3D与2D培养模式下对阿霉素的敏感性。方法应用模板印制凝胶微孔支架技术建立体外3D细胞培养模型,通过倒置显微镜等方法观察3D细胞球的生长特性;采用Alamar Blue法获得不同培养模式下药物阿霉素作用的细胞抑制率;采用流式细胞术比较2D培养和3D培养细胞周期、细胞凋亡的差异。结果3D与2D培养相比,G1/G0期胞增多,S期、G2/M期细胞减少,细胞周期受阻滞,具有统计学差异（P(0.05）;活细胞减少,早期凋亡、晚期凋亡、坏死细胞比例增大（P(0.05）。阿霉素作用3 d后,3D培养细胞的IC50值为23.77μg/ml[95%CI 15.8035.77],2D培养细胞的IC50值为0.46μg/ml（95%CI 0.280.75）,MCRI为51.7。结论 3D培养MCF-7细胞在细胞周期、细胞凋亡等方面与2D培养细胞存在明显差异,可能是导致乳腺癌多细胞耐药的重要原因。