资源类型:
申请人:
首都医科大学附属北京同仁医院
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北京市眼科研究所
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当前专利权人:
首都医科大学附属北京同仁医院
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北京市眼科研究所
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申请号:
申请日期:
授权年份:
公开号:
公开日:
法律状态:
主分类号:
分类号:
摘要:
本发明涉及一种基于线粒体功能障碍的干眼细胞模型的构建方法,其特征是采用靶向敲除或敲低人角膜上皮细胞TFAM表达水平的方法对体外培养的人角膜上皮细胞进行处理,进而定向构建得到线粒体功能障碍诱发的干眼细胞模型。本发明采用靶向敲除/敲低人角膜上皮细胞TFAM的表达来建立一种能更好、更真实的反映线粒体功能障碍诱发的干眼细胞模型,具有模型构建成功率高、模型特征稳定,不产生非目标细胞模型特点,有利于开展下游的线粒体功能障碍在干眼发生发展中的机制研究或治疗方案之间的横向比较。
主权项:
1.一种基于线粒体功能障碍的干眼细胞模型的构建方法,其特征在于,其采用靶向敲除或敲低人角膜上皮细胞TFAM表达水平的方法对体外培养的人角膜上皮细胞进行处理,进而定向构建得到线粒体功能障碍诱发的干眼细胞模型;靶向敲除或敲低人角膜上皮细胞TFAM表达水平的方法,包括使用靶向敲除或敲低细胞中TFAM基因的siRNA; 靶向敲除或敲低细胞中TFAM基因的siRNA是由如下四种siRNA按照1:1:1:1的摩尔比等量组合得到: siRNA-1的核酸序列为:CGGAGUGGCAGGUAUAUAA; siRNA-2的核酸序列为:CCAAGAAGCUAAGGGUGAU; siRNA-3的核酸序列为:GAAAUCAUGGACAAACAUU;siRNA-4的核酸序列为:GAAGAAUUGCCCAGCGUUG。