资源类型：
期刊
收录情况：
◇ 统计源期刊
文章类型：
机构：
[1]湖北中医药大学,湖北武汉430065
[2]武汉大学人民医院,湖北武汉430060
[3]军事医学科学院基础医学研究所,北京100850
[4]武汉市第三医院骨科,湖北武汉430060
出处：
生物技术通讯.2016,27(4):463-467,487.
ISSN：
1009-0002
关键词：
趋化因子CXCL12
腺病毒表达载体
基因转染
间充质干细胞
转录因子Runx2
摘要：
目的:构建趋化因子CXCL12的重组腺病毒表达载体,观察其对间充质干细胞(MSC)中成骨特异性转录因子Runx2表达的影响.方法:将目的基因CXCL12全长cDNA模板进行PCR扩增、酶切后与pHBAd-MCMV-GFP载体结合,获得pHBAd-MCMV-CXCL12-GFP重组载体;将重组载体和包装质粒共转染HEK293细胞进行包装、扩增;利用所携带的绿色荧光蛋白基因测定病毒滴度,观察基因转染效率,QPCR和Western印迹检测CXCL12重组腺病毒转染后MSC中CXCL12和Runx2的表达.结果:酶切、PCR及测序结果证实CXCL12重组腺病毒载体构建成功,转染MSC后CXCL12和Runx2的表达明显升高,AMD3100可以降低CXCL12基因转染后MSC中Runx2的表达.结论:趋化因子CXCL12和MSC表面的CXCR4结合对MSC中成骨特异性转录因子Runx2的表达具有促进作用.
基金：
国家自然科学基金(81472103,81071463);湖北省自然科
学基金重点项目(2015CFA079);武汉市科技局应用基础研究计划
(2015061701011626);武汉市“黄鹤英才”计划;武汉市创新人才开发
资金资助项目;武汉市卫计委中青年医学骨干人才培养工程项目
第一作者：
汪伟
第一作者机构：
[1]湖北中医药大学,湖北武汉430065
通讯作者：
李章华;邹季
推荐引用方式(GB/T 7714)：
汪伟,宁宇,许海甲,等.重组腺病毒CXCL12基因表达载体的构建及其转染间充质干细胞后对其Runx2基因表达的影响[J].生物技术通讯.2016,27(4):463-467,487.
