目的 建立一种高效、简便的HPLC-MS/MS方法检测新生儿血浆中氟氯西林的浓度，研究新生儿体内氨溴索与氟氯西林是否存在相互作用。方法 生物样本采用API4000 HPLC-MS/MS进行分析，色谱柱为Ultimate XB-C18（2.1 mm×100 mm,5μm），流动相A相为水-0.1%甲酸，B相为乙腈-0.1%甲酸。氟氯西林和内标利福平定量分析离子对分别为m/z 452.6→284.2和m/z 821.4→397.3。结果 在该分析方法下氟氯西林的线性范围为0.20～80 ng·m L–1，定量下限为0.20 ng·m L–1；氟氯西林的日内精密度和日间精密度均＜8.23%；提取回收率为85.3%～89.2%，基质效应为89.3%～92.3%；新生儿血浆样品在室温条件下放置12 h，处理后室温条件下放置4 h，反复冻融3次及–20℃冷冻30 d的稳定性均良好。临床样本检测结果表明氨溴索合用可以显著提高氟氯西林血药浓度。结论 本研究所建立的HPLC-MS/MS分析方法准确度高，灵敏度好，可用于新生儿血浆中氟氯西林浓度的测定。临床研究结果表明氨溴索能显著提升氟氯西林的血药浓度，两者存在药物相互作用。