摘要：
目的:探讨枸杞多糖对脓毒症所致内皮细胞功能障碍的影响及其机制.方法:以人脐静脉内皮细胞(humanumbilical vein endothelial cells,HUVECs)为研究对象,脂多糖诱导构建脓毒症引起的内皮细胞功能障碍细胞模型,显微镜观察细胞形态,CCK8检测细胞活力,ELISA检测CRP及TNF-a的水平,鉴定模型构建成功与否.不同浓度的枸杞多糖处理脂多糖诱导前后的HUVECs,CCK8检测细胞活力,筛选枸杞多糖的最佳作用剂量.将HUVECs分成5组:对照组、模型组、枸杞多糖组、AKT抑制剂组和AKT抑制剂组+枸杞多糖组.CCK8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率和ROS水平,生化试剂盒检测细胞内MD A含量,Western blot检测细胞中AKT、p-AKT、eNOS、p-eNOS和VE-cadherin蛋白的表达.结果:与对照组相比,模型组细胞活力显著降低(P＜0.01),细胞凋亡率显著升高(P＜0.01),细胞ROS水平和MDA含量显著升高(P＜0.01),细胞内AKT、eNOS蛋白磷酸化水平和VE-cadherin蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01);与模型组比较,枸杞多糖可显著提高细胞活力(P＜0.01),抑制细胞凋亡(P＜0.01),降低细胞内ROS水平和MDA含量(P＜0.01),促进AKT和eNOS的磷酸化(P＜0.01),上调VE-cadherin蛋白的表达(P＜0.01),而AKT抑制剂组趋势相反;与AKT抑制剂组相比,枸杞多糖能够逆转AKT抑制剂的上述作用(P＜0.01).结论:枸杞多糖能够缓解脂多糖诱导的内皮功能障碍,抑制氧化应激反应和细胞凋亡,其机制可能与促进AKT/eNOS通路的激活有关.
