摘要：
为探讨细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)对高糖(high glucose,HG)诱导的大鼠肾小球系膜细胞RMC炎性因子表达的影响及机制,将RMC细胞分为6组:正常对照(normal control,NC)组、渗透压对照(osmotic control,OSM)组、HG 组、HG+TAK-242(TLR4 抑制剂)组、HG+sh-SOCS3 组和 HG+sh-SOCS3+TAK-242组.CCK-8法检测细胞的存活率;流式细胞术检测细胞的凋亡情况;ELISA检测细胞培养上清液中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6和COX2表达水平;qPCR法检测RMC细胞TLR4、NF-κB p65和IKB-α mRNA的相对表达水平;Western blotting检测RMC细胞TLR4、NF-KBp65、p-p65、IKB-α和p-IκB-α蛋白的表达量.结果显示,与NC组相比,HG组细胞存活率显著降低(P＜0.01),细胞凋亡率,细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6和COX2表达水平,细胞中TLR4、p65、IKB-α mRNA相对表达水平和TLR4、p-p65、p-IKB-α蛋白表达水平均显著升高(均P＜0.01);与HG组相比,HG+TAK-242组和HG+sh-SOCS3组细胞存活率显著升高(均P＜0.05),细胞凋亡率,细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6和COX2表达水平,细胞中TLR4、p65、IκB-α mRNA 表达水平和 TLR4、p-p65、p-IKB-α 蛋白表达水平均显著降低(均 P＜0.05);HG+sh-SOCS3+TAK-242组较HG+TAK-242组效果更加显著(均P＜0.05).由此,SOCS3可通过促进TLR4/NF-KB信号通路的激活上调HG诱导的大鼠系膜细胞炎性因子表达,加重炎症反应.
