摘要：
目的 探讨白芍总苷对帕金森综合征(Parkinson syndrome,PS)大鼠的神经保护及对Ste20相关的富含脯氨酸-丙氨酸激酶/阳离子-氯离子共转运体家族中的钠钾氯共转运体亚型1(Ste20-like proline-/alanine-rich kinase/Na+-K+-Cl-cotransporter 1,SPAK/NKCC1)信号通路的影响.方法 选取60只7周龄雄性SD大鼠构建PS模型,全部造模成功,按造模和给药干预的不同随机分为模型组、白芍总苷低剂量组、白芍总苷高剂量组、白芍总苷高剂量+阴性对照组、白芍总苷高剂量+丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(WNK lysine deficient protein kinase 3,WNK3)过表达组,每组12只,另取12只正常健康大鼠作为对照组.白芍总苷低剂量组、白芍总苷高剂量组分别给予50、200 mg/kg白芍总苷灌胃;白芍总苷高剂量+阴性对照组与白芍总苷高剂量+WNK3过表达组灌胃200 mg/kg白芍总苷并分别尾静脉注射阴性对照质粒、WNK3质粒;对照组给予等量生理盐水;均1次/d,连续给药7 d.酶联免疫吸附测定检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(su-peroxide dismutase,SOD)水平;HE染色检测脑组织黑质区病理形态;TUNEL染色检测神经元细胞凋亡;免疫组织化学检测 α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)表达;Western blot 检测 Bc l-2 相关 X 蛋白(Bcl-2 associated X pro-tein,Bax)、B 淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)及SPAK/NKCC1信号通路相关蛋白[WNK3、磷酸化SPAK(p-SPAK)、SPAK、磷酸化NKCC1(p-NKCC1)、NKCC1]表达.结果 与模型组比较,白芍总苷低、高剂量组黑质区神经元病理损伤减轻,IL-6、IL-1β、MDA水平及神经元凋亡率、Bax、α-syn、WNK3、p-SPAK/SPAK、p-NKCC1/NKCC1 表达降低,SOD 水平及 Bcl-2 表达升高[(88.39±8.96)U/mg,(119.57±12.01)U/mg vs(60.28±6.14)U/mg,P＜0.05;0.57±0.06,0.82±0.09 vs 0.38±0.04,P＜0.05];与白芍总苷高剂量+阴性对照组比较,白芍总苷高剂量+WNK3过表达组黑质区神经元病理损伤加重,IL-6、IL-1β、MDA水平及神经元凋亡率、Bax、α-syn、WNK3、p-SPAK/SPAK、p-NKCC1/NKCC1表达升高,SOD水平及Bcl-2表达降低(P＜0.05).结论 白芍总苷对PS大鼠发挥神经保护作用,其作用机制与抑制SPAK/NKCC1信号通路相关.
