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紫外光-核黄素诱导羊膜胶原交联的实验研究

Cross-linking of human amniotic membrane by ultraviolet A-riboflavin

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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-E ◇ 中华系列

机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科学与视觉科学重点实验室北京市眼科研究所
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关键词: 羊膜 紫外光 核黄素 胶原交联

摘要:
背景 研究证实,紫外光-核黄素光动力疗法可通过改变角膜的理化性质控制圆锥角膜的进展,羊膜移植已广泛用于眼表疾病,羊膜胶原成分与角膜相似,目前关于紫外光-核黄素诱导的胶原交联用于羊膜组织的研究尚少见.目的 探讨紫外光-核黄素对冻存羊膜的作用. 方法 在知情同意条件下,获取并常规处理人羊膜组织,-80℃保存.制备成2 mm×15 mm大小,用简单随机法中的抽签法将其分为4个组,每组6片羊膜,前3组均给予紫外光-核黄素(质量分数0.1%)处理30 min(波长为370 nm,紫外光功率分别为1、2、3 mW/cm2,光源距羊膜10 mm),第4组不做任何处理,为对照组.利用微力材料试验机对处理后的各组羊膜分别进行生物力学测量,记录羊膜长度改变5%、10%、15%时各组样本所需的拉力值(mN).用环钻钻取直径7 mm的羊膜,用抽签法将其分为4个组,每组5片羊膜,各组处理情况同上,将处理后的各组羊膜浸于质量分数0.1%胶原蛋白酶Ⅰ溶液中进行消化,对羊膜透明度进行评分,并记录羊膜完全溶解时间.关于羊膜的组织学观察,用抽签法将羊膜分为紫外光-核黄素组、核黄素组及对照组,每组3片羊膜,各组分别给予紫外光-核黄素(0.1%)处理30 min(波长为370 nm,紫外光功率为3 mW/cm2,光源距羊膜10 mm)、0.1%核黄素浸泡30 min和生理盐水浸泡30 min,透射电子显微镜下进行观察. 结果 羊膜长度改变5%、10%、15%时,对照组和1、2、3 mW/cm2紫外光组4个组所需拉力值差异均有统计学意义(F=3.411,P=0.037;F=9.927,P=0.001;F=11.118,P=0.000);交联后抗拉力性能明显增强,且紫外光功率越大,羊膜的抗拉性增加越明显,差异均有统计学意义(P<0.05).对照组羊膜完全酶解时间为(8.6±1.8)h,1、2、3 mW/cm2紫外光组分别为(39.6±2.3)、(71.4±0.9)、(78.8±1.8)h,交联后抗酶解能力增强,且紫外光功率越大,羊膜的抗酶解能力增强越明显,差异有统计学意义(P<0.01).透射电子显微镜超微结构观察,交联后羊膜基质层胶原纤维密度增加、胶原间连接增多、胶原与上皮间的连接加强.结论 紫外光-核黄素可使冻存羊膜发生胶原交联,从而使其组织结构发生变化,生物力学性质改变,抗酶解能力加强.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科学与视觉科学重点实验室北京市眼科研究所
通讯作者:
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