摘要:
目的探讨不同剂量脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)作用下,出生后不同时间视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)小鼠视网膜组织内bcl-2蛋白表达的动态变化特征。方法分别取生后(postnatal,PN)2周龄、3周龄的rd小鼠各16只,其中各8只玻璃体内注射浓度分别为100μg·L-1和200μg·L-1BDNF,另各8只中4只玻璃体内注射相同体积磷酸盐缓冲液(PBS)作为治疗对照组,另4只玻璃体内不注射任何物质作为空白对照组。取PN-2周龄、3周龄C57BL/6小鼠(各4只)作为正常对照组。在注射后2周时即分别为PN-4周龄和PN-5周龄时将小鼠处死。在小鼠处死后30s内取出眼球,进行冰冻切片的制作和免疫荧光染色(按常规荧光染色程序进行)。Leica DM4000B荧光显微镜观察并照相,Im-age Pro Plus6.0图像分析软件对图像进行半定量分析,选用平均荧光强度为分析指标。结果 100μg·L-1和200μg·L-1BD-NF作用2周后即PN-4周龄rd小鼠视网膜组织内bcl-2的表达:正常对照组视网膜外核层(outer nuclear layer,ONL)外侧面、外丛状层(outer plexiform layer,OPL)、内丛状层(inner plexiform layer,IPL)及神经纤维层(nerve fiber layer,NFL)均有bcl-2蛋白(25.30±2.07)表达;而空白对照组(20.20±5.40)、治疗对照组(15.00±3.70)和BDNF治疗组(102.35±29.89、162.25±30.21)在OPL、IPL和NFL均有表达,其中治疗对照组低于空白对照组,BDNF治疗组高于空白对照组和治疗对照组。100μg·L-1和200μg·L-1BDNF作用2周后即PN-5周龄rd小鼠视网膜组织内bcl-2的表达:正常对照组ONL外侧面、OPL、IPL及NFL均有bcl-2蛋白(28.18±8.64)表达;而空白对照组(15.77±2.05)、治疗对照组(16.76±5.66)和100μg·L-1及200μg·L-1BDNF治疗组(76.00±30.14、136.62±23.52)在OPL、IPL和NFL均有表达,其中空白对照组与治疗对照组相比差异无统计学意义,BDNF治疗组高于空白对照组和治疗对照组。结论 BDNF对不同病变时期RP组织内抗凋亡蛋白的表达有不同效果,注射剂量越高其表达越高,干预时间越早其表达越高。