摘要:
目的观察C反应蛋白(CRP)对培养的肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)增殖的影响,探讨CRP对肺血管疾病的可能作用。方法细胞培养液中,加CRP 0,5,10,20,50,100,200 mg/L培养,依次为Ctrl组、CRP 5组、CRP 10组、CRP 20组、CRP 50组、CRP 100组、CRP 200组。细胞培养液中先加入Wortmannin 1μmol/L,PD098059 20μmol/L和Bay117082 10μmol/L,依次为Wort组、PD组和Bay组,2 h后再加入CRP 100 mg/L培养24 h。各组均加入5’-溴脱氧尿嘧啶共培养4 h测细胞增殖,应用Western blot方法检测细胞外信号调节酶(ERK)1/2和蛋白激酶B(Akt)蛋白表达情况。以非变性凝胶电泳迁移率方法检测NF-κB的激活。结果 CRP刺激hPASMCs的增殖呈浓度依赖性。与Ctrl组比较,除CRP 10组外,各CRP组细胞增殖倍数的差异均有统计学意义(P(0.05,P(0.01),与CRP 100组比较,Wort组、PD组和Bay组细胞增值明显下降(P(0.01)。CRP呈浓度依赖性诱导NF-κB激活,与CRP 100组比较,Wort组和Bay组抑制NF-κB激活。与Ctrl组比较,CRP 10组起p-Akt和ERK1/2表达增加。与CRP 100组比较,Wort组p-Akt表达下降,PD组p-ERK1/2表达下降。结论 CRP浓度依赖性地促进hPASMCs的增殖。CRP通过激活信号通路磷脂酰肌醇3激酶/Akt,丝裂原活化蛋白激酶/ERK1/2和NF-κB介导促增殖作用。