摘要：
目的:研究兔原代肋软骨细胞的高效分离及体外培养快速增殖方法.方法:取2月龄新西兰大白兔肋软骨,以培养液配制的0.1%Ⅱ型胶原酶分离兔肋软骨细胞,检测细胞收获效率和存活率.体外培养并传代,观察细胞形态、生长及胞外基质中胶原的变化.结果:①肋软骨经Ⅱ型胶原酶消化软骨基质逐步解离和降解,细胞被完全分离,细胞存活率平均为97.1%;②原代、第1代和第2代细胞贴壁生长呈三角形或多角形,生长融合时呈卵圆形,麦松三色反应呈阳性,第3代细胞逐渐变为梭形;③传代细胞在75cm2培养瓶中培养的增殖量大约是在25cm2瓶中增殖量的2.96倍.结论:①Ⅱ型胶原酶能完全消化降解肋软骨基质,使细胞完全分离,并具有高细胞收获率和高细胞存活率;②原代、第1代和第2代肋软骨细胞具有良好的生物学活性;③传代细胞在75cm2培养瓶中培养,可以减少传代次数而收获所需数目的细胞.
