摘要：
目的:探讨撤除细胞因子对脐血造血细胞凋亡的影响及Caspase-3蛋白的相对表达情况.方法:无菌条件纯化获得脐血CD34+细胞,采甩StemSpanTMSFEM无血清液体培养基,TPO50μg/L,SCF50μg/L细胞因于组合扩增CD34+细胞7天.撤除细胞因子1天和3天,收集适量细胞.用流式细胞仪单色荧光标记检测新鲜分离的CD34+细胞纯度,FITC-Annexin-V双色荧光标记检测细胞凋亡丰,比色法检测Caspase-3蛋白相对表达.结果:免疫磁珠MACS分离系统可有效而高质量的分离脐丘CD34+细胞,纯度高达(98.28±2.62)%;用TPO和SCF可使脐血CD34+细胞明显扩增;收集扩增7天的细胞,撤除细胞因子1天后细胞凋亡丰(24.79±2.80)%较对照组(2.69±0.43)%明显增高;撤除细胞因子1天和3天,Caspase-3蛋白相对表达均升高近1倍.结论:撤除细胞因子可诱导脐血造血细胞凋亡,并且Caspase-3参与了凋亡事件并发挥着重要作用.
