摘要:
目的:培养猪的虹膜色素上皮(IPE)细胞并进行IPE的生物学评价,为IPE移植治疗视网膜色素变性(RP)打下基础.方法:采用酶辅助的显微分离法对50只猪眼进行IPE的原代和传代培养,免疫组化方法鉴定细胞,并对其生物学性状进行评价.结果:从IPE生长曲线上看,细胞于接种后2天开始进入细胞对数生长期,经过3~4天的对数期生长后进入生长缓慢的平台期.细胞培养成功率为85.0%.原代细胞的贴壁率为31.8%±3.7%,细胞的活力为82.5%±5.1%,传代细胞的贴壁率为86.4%±4.3%,细胞的活力为91.2%±3.7%.伸展率为83.6%±5.3%,分裂时间为2~7天,平均3.5±0.96天,总分裂次数为6~10代.免疫组织化学显示,培养获得的IPE细胞的细胞角蛋白(AE1/AE3)和S-100抗原染色均为阳性.结论:对IPE细胞的生物学评价,不仅证实了IPE细胞高效纯化培养的实现,而且系列完整的数据为IPE移植治疗RP的相关实验提供了必要的基础保证.