目的探讨EB病毒（EBV）原位杂交检测在组织冷冻切片检测中的效果。方法收集2017-01—2019-12北京同仁医院病理科收检的同一病例经冷冻和未冷冻的标本,均行EBV编码的小RNA转录产物（EBV-encoded RNA,EBER）原位杂交92例,对结果进行回顾性分析。结果 92例发病年龄为6～81岁,平均年龄47±16岁。男性62例,女性30例。冷冻过的组织与未冷冻的组织在EBER原位杂交的检测中一致率为93. 5%,检测结果不完全一致的有6例,占6. 5%。其中与鼻咽癌有关的4例,淋巴组织反应性增生1例,淋巴上皮癌1例。经冷冻和未经冷冻的标本EBER原位杂交检测结果一致为阳性的共38例（占41. 3%）,分别为鼻咽癌24例,不除外EB病毒感染相关淋巴组织增生性病变1例,NK/T淋巴瘤11例,淋巴上皮癌2例。经冷冻和未经冷冻的标本EBER原位杂交检测一致为阴性的共48例,占总病例数的52. 2%。分别为淋巴瘤（非NK/T淋巴瘤） 13例,淋巴组织反应性增生26例,非角化鳞状细胞癌4例,NUT癌1例,纤维型骨肉瘤1例,单相型滑膜肉瘤1例,Wegener肉芽肿1例,淋巴上皮癌1例。结论未经冷冻的组织EBER原位杂交检测效果优于经过冷冻的标本,在诊断鼻咽癌等需特别关注EBV表达情况的疾病时,一定要结合经冷冻和未经冷冻的标本检测结果综合评估,建议优先选用未经冷冻的标本进行检测。