目的：检测胰腺癌(PC)组织及PC细胞系中微小RNA(miRNA,miR)-125a-5p的表达及其对PC细胞吉西他滨(Gem)耐药性的影响。方法：收集13对PC及对应癌旁组织标本；构建PC Gem耐药细胞系；实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证所有样本miR-125a-5p的表达；通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库对PC患者的生存预后进行差异分析；转染miR-125a-5p模拟物(mimic)及抑制剂，细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测PC细胞Gem的半数抑制浓度(IC50),探讨miR-125a-5p对细胞耐药的影响。数据库预测miR-125a-5p的靶基因，蛋白印迹法检测miR-125a-5p对信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达的影响。结果：PC组织miR-125a-5p的表达显著低于癌旁组织，PC细胞系miR-125a-5p的表达较正常胰腺细胞明显降低。miR-125a-5p与PC患者的生存预后密切相关。miR-125a-5p在Gem处理的PC细胞表达下调。与非耐药细胞比较，耐药细胞miR-125a-5p的表达明显减低。CCK-8结果显示转染miR-125a-5p模拟物后细胞的IC50值显著降低，转染miR-125a-5p抑制剂后细胞的IC50值显著升高。过表达miR-125a-5p抑制STAT3蛋白的表达。结论：miR-125a-5p在PC中表达降低，并与PC患者生存预后相关，miR-125a-5p可能通过抑制STAT3介导PC Gem耐药。