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极度低氧条件下基质细胞衍生因子-1alpha过表达对间充质干细胞迁移的影响

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收录情况: ◇ 统计源期刊

机构: [1]武汉大学同仁医院骨科 [2]武汉体育学院研究生院 [3]湖北省襄阳市中医医院骨科
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关键词: 极度低氧 间充质干细胞 基质细胞衍生因子-1α 迁移

摘要:
目的 研究极度低氧条件下基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)过表达对间充质干细胞(MSCs)迁移的影响。方法 将来源于两只普通级雄性日本大耳白兔[2周龄,体重(250±30)g]的MSCs分为空白组(不进行干预),AMD3100组[加入SDF-1α受体(CXCR4)特异性抑制剂AMD3100],SDF-1α腺病毒(Ad-SDF-1α)组(进行AdSDF-1α转染)和Ad-SDF-1α+AMD3100组(进行Ad-SDF-1α转染并添加AMD3100)。四组在极度低氧(1%)条件下培养48 h,通过Transwell实验检测其迁移能力,采用实时荧光定量PCR及Western blot检测迁移信号轴缺氧诱导因子-1(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、CXCR4的mRNA及蛋白表达情况。结果 MSCs贴壁后为梭形、多角形,呈克隆式生长,Ad-SDF-1α转染后可观察到均一且明亮的绿色荧光。AMD3100组光密度(OD)值低于空白组,Ad-SDF-1α组OD值高于空白组,Ad-SDF-1α+AMD3100组OD值高于AMD3100组且低于Ad-SDF-1α组,差异均有统计学意义(P <0.05)。AMD3100组VEGF、CXCR4 mRNA表达低于空白组,Ad-SDF-1α组HIF-1α、VEGF、CXCR4 mRNA表达均高于空白组,差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。Ad-SDF-1α+AMD3100组VEGF、CXCR4 mRNA表达均高于AMD3100组,HIF-1α、VEGF、CXCR4 mRNA表达均低于Ad-SDF-1α组,差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。AMD3100组HIF-1α、VEGF、CXCR4蛋白表达低于空白组,Ad-SDF-1α组HIF-1α、VEGF、CXCR4蛋白表达均高于空白组,Ad-SDF-1α+AMD3100组HIF-1α、VEGF、CXCR4蛋白表达均高于AMD3100组且均低于Ad-SDF-1α组,差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。结论 极度低氧条件下SDF-1α过表达仍可促进MSCs迁移,并一定程度上可逆转AMD3100的抑制效应。

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第一作者机构: [1]武汉大学同仁医院骨科
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