摘要:
目的探讨人结肠癌来源的间充质干细胞所分泌的外泌体对结肠癌细胞生物学功能的影响。方法将人结肠癌干细胞诱导培养出人结肠癌间充质干细胞(human colon cancer mesenchymal stem cells,h CC-MSCs),利用流式细胞学和成骨、成脂诱导分化实验验证间充质干细胞的多能性。利用Exo Quick试剂盒提取h CC-MSCs外泌体(exosomes secreted from human colon cancer mesenchymal stem cells,h CC-MSCs-Exo),通过电镜、粒径分析和Western blot进行鉴定。采用PKH67标记h CC-MSCsExo,与HCT-116和HT-29共培养,荧光显微镜观察结肠癌细胞株摄取外泌体的情况,最后利用CCK8增殖实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测h CC-MSCs-Exo对结肠癌细胞株生物学功能的影响。结果 h CC-MSCs细胞呈单层贴壁生长,阳性表达CD29、CD90及CD105,阴性表达CD34、CD45及HLA-DR,具有成骨分化和成脂分化的多能性。h CC-MSCs-Exo平均直径135 nm,阳性表达Alix、CD63及CD81。h CC-MSCs-Exo与结肠癌细胞株共培养后,结肠癌细胞株能够摄取h CC-MSCs-Exo,且主要分布于细胞质中。CCK8、划痕实验和Transwell实验表明,与对照组相比,共培养组结肠癌细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力显著增强(P (0. 05)。结论 h CC-MSCs-Exo能够促进结肠癌细胞增殖、迁徙和侵袭,为结肠癌药物治疗提供潜在的新治疗靶点。