摘要：
目的 在细胞模型中研究白芍总苷抗非酒精脂肪肝的作用机制.方法 采用油酸干预HepG2细胞构建脂肪肝细胞模型,油红O染色观察细胞内脂肪滴.采用CCK-8检测白芍总苷对细胞增殖能力的影响,并筛选出最佳的作用浓度和作用时间.将细胞分为4组:对照组、模型组、白芍总苷预处理组和治疗组.生化实验检测细胞总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)活性.透射电子显微镜观察细胞线粒体的超微结构.Real-time PCR检测细胞酰基辅酶A氧化酶1(acyl coenzyme A oxidase1,ACOX1)基因表达水平.Western blot检测细胞线粒体融合蛋白1(Mitofusin 1,Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mitofusin 2,Mfn2)、视神经萎缩蛋白1(Optic atrophy 1,Opa1)和发动蛋白相关蛋白1(Dynamin-related protein 1,Drp1)表达水平.结果 成功构建脂肪肝细胞模型,筛选出白芍总苷的最佳的作用浓度为80μg/mL,作用时间为24 h.与对照组比较,模型组TC、TG、MDA浓度及ALP和ALT活性均显著升高(P<0.05),GSH-Px活性显著降低(P<0.05),线粒体肿胀,嵴稀疏、断裂、溶解,逐渐空泡化,ACOX1 mRNA和Mfn1、Mfn2、Opa1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Drp1蛋白表达水平显著升高(P<0.05).与模型组比较,白芍总苷预处理组和治疗组细胞TC、TG、MDA浓度及ALP和ALT活性均显著降低(P<0.05),GSH-Px活性显著升高(P<0.05),大部分线粒体膜结构较为完整,嵴结构清晰且紧密排列,ACOX1 mRNA和Mfn1、Mfn2、Opa1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Drp1蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论 白芍总苷对脂肪肝具有较好的防治作用,其作用机制与改善线粒体损伤,保护线粒体功能有关.
