摘要：
目的 探讨微小核糖核酸(miR)-630 靶向锌指转录因子Slug信号通路调节人肾癌细胞株ACHN侵袭、迁移的作用.方法 取人肾癌细胞株ACHN培养传代,分为正常组(未转染)、阴性对照组(转染携带miR-630 抑制剂阴性对照的慢病毒)、过表达组(转染携带miR-630 模拟物的慢病毒)、低表达组(转染携带miR-630 抑制物的慢病毒).培养 48 h后,Tr-answell小室实验检测各组细胞侵袭能力,划痕实验检测各组细胞迁移能力;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测量miR-630、E-钙黏蛋白(cadherin)、Slug、波形蛋白(Vimentin)和 N-cadherin信使核糖核酸(mRNA)表达;Western印迹法检测各组Slug、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测验证miR-630 是否靶向Slug信号通路.结果 阴性对照组、过表达组和低表达组转染效率分别为(87.39±17.36)%、(86.11±17.01)%和(85.43±16.98)%,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).与正常组和阴性对照组比较,过表达组穿膜细胞数、miR-630 mRNA、Vimentin和N-cadherin mRNA和蛋白表达显著升高,划痕间距(48 h)显著减小,E-cadherin、Slug mRNA和蛋白表达显著减少(P＜0.05).与阴性对照组、正常组和过表达组比较,低表达组miR-630 mRNA、N-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白表达及穿膜细胞数减少,Slug、E-cadherin mRNA和蛋白表达增加,划痕间距(48 h)增加,差异有统计学意义(P＜0.05).双荧光素酶报告基因实验证实miR-630 靶向Slug.结论 miR-630 可能通过靶向调节Slug信号通路,上调N-cadherin、Vimentin表达,下调E-cadherin表达,进而促进肾癌细胞侵袭和迁移.
