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文章类型：
机构：
[1]天津医科大学眼科医院、眼视光学院、眼科研究所国家眼耳鼻喉疾病临床医学研究中心天津市分中心天津市视网膜功能与疾病重点实验室,天津 300384
出处：
ISSN：
关键词：
组织蛋白酶L
视网膜色素上皮细胞
细胞凋亡
氧化应激
线粒体
细胞实验
摘要：
目的 观察组织蛋白酶(CTS)L抑制剂对视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡的作用及其对线粒体氧化应激的影响.方法 体外培养的人RPE细胞分为正常组、过氧化氢(H2O2)组、H2O2+CTSL抑制剂组.H2O2组、H2O2+CTSL抑制剂组置于含400 μmol/L H2O2的培养基孵育24 h;H2O2+CTSL抑制剂组同时加入10μmol/1CTSL抑制剂.正常组为常规培养细胞.建模后24 h进行后续实验.流式细胞仪检测细胞凋亡率;细胞免疫荧光染色、蛋白质免疫印迹法、实时定量聚合酶链反应检测细胞中CTSL表达水平;MitoSOX荧光探针检测细胞中线粒体超氧化物表达水平;MitoTracker染色观察线粒体形态,定量分析线粒体平均面积、形状因子、分支节点.两组间比较采用双尾Student t检验;多组间比较采用单因素方差分析.结果 与正常组比较,H2O2组细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(t=3.307,P=0.029 7);细胞中CTSL表达水平升高(t=19.950、6.916、14.220,P＜0.05).与H2O2组比较,H2O2+CTSL抑制剂组CTSL表达水平、细胞凋亡率、细胞线粒体超氧化物水平显著降低,差异有统计学意义(t=11.940、4.718、16.680,P＜0.05).H2O2+CTSL抑制剂组细胞线粒体呈细长椭圆形或杆状;H2O2组细胞线粒体失去其连续轮廓与完整形态.4组细胞线粒体评价面积、形状因子、分支节点比较,差异有统计学意义(F=251.700、34.010、60.500,P＜0.000 1).结论 H2O2显著诱导RPE细胞的凋亡、CTSL表达升高;CTSL抑制剂可抑制H2O2诱导的RPE细胞凋亡,降低线粒体超氧化物水平,有效恢复线粒体形态.
基金：
天津市高等教育委员会科技发展基金项目（2022ZD057）；天津市滨海新区卫生健康委员会科技项目（2022BWKZ003）；天津市视网膜功能与疾病重点实验室开放项目（2021tjswmm002）；天津市卫生健康科研项目（TJWJ2023ZD002）；天津市医学重点学科（专科）建设项目（TJYXZDXK-037A）
第一作者：
第一作者机构：
[1]天津医科大学眼科医院、眼视光学院、眼科研究所国家眼耳鼻喉疾病临床医学研究中心天津市分中心天津市视网膜功能与疾病重点实验室,天津 300384
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
何珍,寇振宇,东莉洁,等.组织蛋白酶L抑制剂经线粒体途径抑制氧化应激诱导的视网膜色素上皮细胞凋亡[J].中华眼底病杂志.2024,40(5):379-386.
