摘要:
背景与目的:斯钙素1(stanniocalcin l,STC1)在多种癌组织中表达上调,且与癌组织的恶性程度相关,但STC1在肺癌细胞中的分子作用机制尚不明确。本研究旨在探讨STC1的表达对肺癌细胞A549细胞周期及凋亡的影响。方法:构建STC1基因RNA干扰的肺癌细胞株A549-STC1-si RNA和对照细胞株A549-Vector,用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测A549-Vector及A549-STC1-si RNA细胞株的细胞周期蛋白基因Cyclin A、Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E、CDK2、CDK4,凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xl及凋亡诱导基因Caspase-3、Bax、Bak、Bid的表达水平,用流式细胞术检测STC1基因对A549细胞周期的影响,用原位末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick-end labeling,TUNEL)检测STC1基因对A549细胞凋亡的影响。结果:与A549-Vector细胞相比,A549-STC1-si RNA的细胞周期蛋白基因Cyclin A、Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E、CDK2和CDK4在转录和蛋白表达水平上均显著减少(P(0.05),G0/G1期细胞比例明显增加,S期及G2/M期细胞比例降低(P(0.05),细胞周期受阻;A549-STC1-si RNA的凋亡抑制基因Bcl-2和Bcl-xl表达下调(P(0.05),而凋亡诱导基因Caspase-3、Bax、Bak及Bid显著上调(P(0.05);TUNEL实验表明,A549-STC1-si RNA细胞的凋亡率明显增加。结论:STC1基因的低表达可阻滞肺癌细胞A549的细胞周期,抑制细胞增殖,同时促进细胞凋亡。