摘要：
目的:构建VIM（Vimentin）基因的真核表达载体,以深入研究VIM的功能及其在相关疾病中的作用。方法:从人cDNA文库中,以RT-PCR方法扩增出1401 bp的VIM编码区片段,胶回收后连接入T载体,测序鉴定。再用Hind III和BamH I双酶切,将VIM编码区片段定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,酶切鉴定重组质粒。将重组质粒转染NIH3T3细胞,分别以RT-PCR和Western Blot方法检测VIM的mRNA表达和蛋白表达。结果:将人VIM编码区基因成功克隆到真核表达载体pcDNA3.1中;继而转染NIH3T3细胞后,RT-PCR和Western Blot结果显示细胞可以表达VIM的mRNA和蛋白。结论:成功构建pcDNA3.1-VIM的真核表达载体,为进一步研究VIM基因的功能以及其在相关疾病中的作用奠定了基础。
