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机构：
[1]首都医科大学附属北京同仁医院心脏中心
首都医科大学附属北京同仁医院
首都医科大学附属同仁医院
[2]四川大学华西医学中心
四川大学华西医院
出处：
ISSN：
关键词：
Toll样受体-4
克隆
真核表达
摘要：
为探讨TLR-4基因在真核细胞的表达情况,用RT-PCR技术从人脐静脉血管内皮细胞总RNA扩增TLR-4全密码子cDNA序列.限制性内切酶HindⅢ和BamHⅠ双酶切真核表达质粒pcDNA3和TLR-4 cDNA片段,构建重组质粒pcDNA3-TLR4 .用Dosper阳离子转染试剂包裹质粒,转染人胚肾293细胞(HEK 293细胞).用免疫荧光细胞化学染色及流式细胞术分析TLR-4 基因表达.结果:从人脐静脉血管内皮细胞扩增出2 726 bp的TLR-4 cDNA片段.经PCR、酶切及序列测定分析证实质粒pcDNA3内插入了TLR-4 cDNA片段,免疫荧光细胞化学染色和流式细胞术分析均检测到TLR-4基因在人胚肾293细胞表达.本研究显示重组真核表达质粒pcDNA3-TLR4在HEK 293细胞表达TLR-4蛋白,有利于进一步研究其相应配体和信号传导通路.
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学附属北京同仁医院心脏中心
推荐引用方式(GB/T 7714)：
梁峰,胡大一,王伯瑶,等.炎症信号受体tlr-4基因的克隆及真核表达[J].首都医科大学学报.2004,25(1):40-43.
