摘要 目的 探讨经亚硒酸钠(Na2Se03)处理、K562细胞裂解物冲击致敏的外周血衍生的树突状细胞(DCs)的生物学特性和体外诱导抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的应答能力。方法(1)DC细胞培养和分组:健康人外周血单个核细胞(PBMNC)在体外含4种细胞因子(mGM、CSF、IL-4、TNF-a)的RPMI-1640+10%FBS培养基中培养4天,收获贴壁细胞,分4组:DC-I组:单独 DC;DC-Ⅱ组:DC+Se(0.5μmoVL);DC-Ⅲ组:DC+K562细胞裂解液;DC-I组:在DC-Ⅲ组中加人 Se(0.5umol/L)。(2)DC细胞形态观察:第7天于倒置显微镜下行活细胞观察;(3)CTL效应:乳酸脱氢酶(1.DH)释放试验:(4)I-12含量测定:酶联免疫吸附试验(ELISA)。结果(1)各组 DC细胞均具有典型树突状细胞形态，均较培养前集落增多。DC-1组和DC-Ⅱ组的细胞形态及数量无明显差距,DC-亚和 DC-Ⅳ组的细胞集落数量增加,悬浮细胞比例增加;(2)在效靶比例为 25:1时,各组 DC致敏的T淋巴细胞4天后对 K562 细胞的杀伤率为15.3+ 2.3%、26.3+3.7% 、28.2 +4.5%和36.2+3.7%,均明显高于未经 DC致敏的单独T淋巴细胞组(5.9+2.4%)(P<0.01),DC-Ⅳ的CTL效应最强,高于 DC-1、Ⅱ、Ⅲ组(P<0.01),DC-Ⅱ和DC-Ⅲ组的CTL效应也高于 DC-1组(P<0.01),而CTL效应程度在 DC-Ⅱ和 DC-Ⅲ两组间无明显差异(P>0.05);(3)各组DC与T淋巴细胞共培养的上清液中Ⅱ-12水平(pg/ml)为256.96+64.2 328.12+43.9、322.98+53.5和 353.85+46.2,均显著高于未经DC致敏的单独T淋巴细胞组(35.27+ 27.1)(P<0.01)，DC-Ⅱ、DC-亚和DC-Ⅳ的儿-12水平均高于DC-1(P<0.01),而其在DC-Ⅱ、亚和DC-I三组间无明显美异(P>0,05)。结论(1)应用含细胞因子(GM-CSF、IL-4和INF-8)的体外培养体系可从健康人的PBMNC中收获成熟 DC细胞,(2)经K562细胞裂解液冲击致敏可以促进 DC分泌Ⅱ-12 和诱导特异性杀伤靶细胞的 CTL 效应;(3)小剂量亚硒酸钠(0.5umo/L)对体外培养体系收获 DC的形态和数量无明显影响,它促进 DC分泌儿-12的水平与 K562 细胞裂解液致敏的DC相当,并在诱导CL效应中与后者有协同作用。