[摘要]目的 探讨经K562细胞裂解物冲击致敏的外周血单个核细胞衍生的树突状细胞(DC)的生物特性及体外诱导抗原特异性CTL应答的能力。方法采集健康人抗凝外周血分离单个核细胞,贴壁细胞用含CM-CSF、mIL-4、TNFa的 RPM1640+10%FBS培养基体外诱导培养产生 DC,5天收获细胞并将细胞分组:A组:未负载抗原 DC:B组:加人 K562细胞裂解液脉冲 DC。7天后用流式细胞仪检测成熟DC免疫表型,并将非贴壁细胞(淋巴细胞)作为效应细胞与各组 DC共育,以产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。12天用LDH 释放试验测定对K562细胞的杀伤活性。并用 ELISA方法测定细胞上清液中儿-12的含量。结果(1)经细胞因子联合体外诱导的各组DC较培养前在数量,形态及免疫表型上差异有统计学意义,CD86、CD83、CD40、CDIa表达增加,其中经K562细胞裂解液冲击的DC的CD83 CD86表达率明显升高。(2)效 应细胞与 K562 细胞混合培养时,负载 K562 细胞裂解液的 DC 刺激后的T细胞比单独 DC 刺激后的T细胞对 K562 细胞的杀伤作用更明显。(3)负载 K562细胞裂解液的 DC细胞培养上清液中产生儿-12含量较未负载抗原的 DC明显增加。结论用GM-CSF、IL4以及TNF-a诱导培养健康人外周血单个核细胞可以得到成熟的 DC,且经 K562 细胞裂解液致敏可以进一步促进DC的成熟并体外诱导特异性杀伤靶细胞的CTL。