摘要：
目的 探讨长链非编码RNA核富集丰富转录本1(lncRNA Neat1)通过miR-204-3p介导p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路调控白蛋白诱导HK-2细胞凋亡的机制.方法 将HK-2细胞分为对照组(正常培养)、模型组(白蛋白损伤模型)、p38抑制药组(10 μmol·L-1p38抑制药SB203580处理后造模)、OV-Neat 1组(转染Neat 1过表达质粒后造模)和OV-Neat 1+p38抑制药组(转染Neat 1过表达质粒,再用p38抑制药SB203580处理后造模).用细胞计数法-8(CCK-8)检测细胞增殖活力,用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-204-3p、B细胞淋巴瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA的表达水平;用蛋白质印迹法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达水平.结果 对照组、模型组、p38抑制药组、OV-Neat 1组和OV-Neat 1+p38抑制药组的细胞增殖活性分别为 0.95±0.02、0.70±0.01、0.78±0.02、0.63±0.01 和0.75±0.02,细胞凋亡率分别为(4.38±1.03)％、(23.79±0.97)％、(16.79±0.55)％、(31.26±0.79)％和(20.75±1.44)％,miR-204-3p 表达 水平分 别 为1.00±0.02、0.08±0.00、0.42±0.03、0.04±0.00 和 0.16±0.01,Bax mRNA 表达水平分别为 1.00±0.05、7.57±0.21、1.91±0.10、18.82±0.88 和3.21±0.26,Bcl-2 mRNA 表 达水平 分别为 1.00±0.04、0.10±0.01、0.58±0.06、0.04±0.00 和 0.30±0.04,Bax 蛋白表达水平分别为 0.18±0.02、0.64±0.00、0.25±0.03、0.85±0.01 和 0.29±0.01,Bcl-2 蛋白表达水平分别为0.98±0.01、0.23±0.00、0.48±0.02、0.17±0.01 和 0.36±0.02.模型组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01);OV-Neat 1组和p38抑制药组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05);OV-Neat 1+p38抑制药组的上述指标与OV-Neat 1组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 lncRNA Neat 1过表达能激活p38MAPK信号通路,促进白蛋白诱导的HK-2细胞凋亡,抑制miR-204表达.
