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miR-548b-3p通过调控诱骗受体3的表达影响肝癌细胞恶性生物学性状的研究

miR-548b-3p regulates the expression of decoy receptor 3 and influences the malignant biological traits of hepatoma cells

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 中华系列

机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院普外科,北京100176 [2]山西医科大学第一医院普外科,太原030001
出处:
ISSN:

关键词: 肝细胞 细胞增殖 细胞迁移分析 miR-548b-3p 诱骗受体3

摘要:
目的:探讨 miR-548b-3p是否可以通过下调诱骗受体3(DcR3)的表达进而调节肝癌细胞的恶性生物学性状。 方法:通过实时荧光定量PCR检测Hep3b、HepG2、Huh7.5.1、PLC、97H等5种常见肝癌细胞系中 miR-548b-3p的水平,实验用肝癌细胞系购自上海市肿瘤研究所。裸鼠皮下成瘤性实验包括 miR-548b-3p过表达和低表达两部分: miR-548b-3p过表达实验包括Huh7.5.1- miR-548b-3p细胞组和Huh7.5.1-NC细胞组; miR-548b-3p低表达实验组包括PLC- miR-548b-3p-sponge组和PLC-NC细胞组,每组分别5只裸鼠。实验用裸鼠为雄性Balb/c品系,体重20~25 g,4~6周龄。利用Starbase软件预测 miR-548b-3p与 DcR3是否存在结合位点;双荧光素酶报告实验验证 DcR3是否为 miR-548b-3p的靶基因。通过拯救实验验证 miR-548b-3p对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响是否通过 DcR3来实现。采用Graphpad Prism 9进行统计分析,符合正态分布的计量资料以均数±标准差( ± s)表示,组间比较采用 t检验。 结果:实时荧光定量PCR以2 -ΔΔCt相对表达量为参数进行比较,假设Hep3b相对表达量为1,HepG2相对表达量为0.902,Huh7.5.1相对表达量为0.712,PLC相对表达量为1.293,97H相对表达量为0.818,最后结果表明, miR-548b-3p表达最高的是PLC细胞,表达最低的是Huh7.5.1细胞;裸鼠皮下成瘤性实验表明,实验4周后,Huh7.5.1- miR-548b-3p组成瘤体积为(444.77±142.34) mm 3,Huh7.5.1-NC组成瘤体积为(918.80±139.21) mm 3;PLC- miR-548b-3p-sponge组成瘤体积为(407.49±58.50) mm 3,PLC-NC组成瘤体积为(218.62±47.55) mm 3;利用Starbase软件预测到 miR-548b-3p与 DcR3存在结合位点;双荧光素酶报告实验证明 DcR3是 miR-548b-3p的靶基因;拯救实验验证 miR-548b-3p对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响是通过 DcR3来实现的。 结论:miR-548b-3p可调节肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移等恶性生物学性状,并且是通过下调 DcR3的表达水平来实现的。

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第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京同仁医院普外科,北京100176
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