摘要：
目的:探讨早期生长反应1(EGR1)调控Wnt/β-catenin通路对结直肠癌细胞的5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的影响及机制.方法:首先构建EGR1过表达载体转染至结直肠癌LoVo细胞,并结合Wnt/β-catenin 通路抑制剂,将细胞分为 Control 组、EGR1 NC 组、ov-EGR1 组、inhibitor 组和 ov-EGR1+inhibitor组.CCK8检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR检测EGR1的mRNA表达,Western blot 检测 Caspase3、EGR1 和 β-catenin 的蛋白表达.分别用 0、1、5、10、20、40 μmol/L 的 5-FU 处理各组细胞,通过CCK8检测细胞活性评价药物敏感性变化.结果:与Control组相比,EGR1过表达和Wnt/β-catenin通路抑制剂均能抑制细胞增殖活力(P＜0.05),提高细胞凋亡率(P＜0.05),上调EGR1 mRNA和蛋白表达(P＜0.05),Caspase3蛋白表达(P＜0.05),下调β-catenin蛋白表达(P＜0.05),增强细胞对5-FU的药物敏感性(P＜0.05).与inhibitor组相比,ov-EGR1+inhibitor组细胞增殖活力下降(P＜0.05),细胞凋亡率上升(P＜0.05),EGR1 mRNA表达上调(P＜0.05),EGR1和Caspase 3蛋白表达上调(P＜0.05),β-catenin蛋白表达下调(P＜0.05),细胞的药物敏感性增强(P＜0.05).结论:上调EGR1表达能抑制Wnt/β-catenin通路的激活,降低人结直肠癌细胞对5-FU的耐药性,进而促进癌细胞凋亡.
