目的建立同时测定比格犬血浆中甘精胰岛素及其代谢物21A-甘氨酸胰岛素（M1）和21A-甘氨酸-脱-30B-苏氨酸胰岛素（M2）浓度的液质联用（LC-MS/MS）方法。方法用乙酸-甲醇-乙腈溶液（2∶50∶50,v/v/v）沉淀血浆蛋白,上清液经固相萃取处理;以赖脯胰岛素为内标,用Grace Alltima HP C18（2.1 mm×50 mm,5μm）色谱柱,流动相为10%甲醇水溶液-甲醇（含0.2%甲酸）,梯度洗脱方式,柱温为50℃,流速为0.4 m L·min-1;用API4000质谱检测器,电喷雾离子源,正离子模式,多反应监测扫描方式测定样品中的待测物浓度。考察该定量方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度、准确度、提取回收率、稳定性及基质效应等。结果甘精胰岛素及其代谢物M1和M2的线性范围均为0.310 ng·m L-1（r2)0.990 0）,定量下限为0.3 ng·m L-1;批内及批间精密度（RSD%）均小于15%,准确度（RE%）均在±15%;提取回收率分别为41.88%48.77%,31.08%35.09%和28.95%33.50%;样品反复冻融2次、室温放置2 h、4℃放置76 h、-70℃放置65 d,稳定性均良好。结论本方法快速、灵敏、准确、专属性好、稳定性佳,可用于同时测定血浆中甘精胰岛素及其代谢物的浓度。