摘要：
目的 观察严重烧伤早期大鼠心肌组织中微小RNA-126与血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)的表达变化以及两者的相关性,并在细胞水平验证微小RNA-126与心肌损害的关系.方法 (1)将48只SD大鼠按照随机数字表法分为假伤组8只(致假伤,不予补液)和烧伤组40只(背部造成30％ TBSAⅢ度烫伤,以下称烧伤,伤后经腹腔注射乳酸林格液).假伤组伤后1h收集腹主动脉血,之后处死大鼠取左心室组织;伤后3、6、12、24、48 h,烧伤组分别取8只大鼠采集腹主动脉血,之后处死大鼠取左心室组织.实时荧光定量RT-PCR法检测心肌组织中微小RNA-126的表达水平,ELISA法检测血清cTnⅠ水平.(2)将大鼠心肌细胞株H9C2细胞按随机数字表法分为正常对照组(常规培养)、刺激组、阴性转染+刺激组、转染+刺激组.刺激组将细胞置于含体积分数10％烧伤大鼠血清的DMEM培养液中行缺氧处理24 h;阴性转染+刺激组、转染+刺激组分别用微小RNA模拟物阴性对照、微小RNA-126模拟物转染细胞24 h后,同刺激组处理.其中烧伤大鼠血清来源于实验(1)伤后6h留取血清.实时荧光定量RT-PCR法检测心肌细胞中微小RNA-126表达(样本数为3),用细胞计数试剂盒8检测心肌细胞活力(样本数为4,数据以吸光度值表示),流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率(样本数为3).对数据行单因素方差分析、LSD-t检验,对大鼠心肌组织微小RNA-126表达与血清cTnⅠ水平行直线相关分析.结果 (1)与假伤组伤后1h比较,烧伤组伤后各时相点大鼠心肌组织微小RNA-126表达水平均明显降低(t值为5.68 ～9.79,P值均小于0.01),其中伤后24 h达最低值(0.40±0.08);与假伤组伤后1h比较,烧伤组伤后各时相点大鼠血清cTnⅠ水平均明显升高(t值为6.68 ～ 12.79,P值均小于0.01),其中伤后12 h达峰值[(1 035±177)pg/mL].烧伤组大鼠各时相点心肌组织微小RNA-126表达水平与血清cTnⅠ水平呈明显负相关(r=-0.797,P＜0.001).(2)与正常对照组比较,刺激组、转染+刺激组心肌细胞微小RNA-126表达分别明显下降、升高(t值分别为4.57、5.73,P＜0.05或P＜0.01),心肌细胞活力均明显下降(t值分别为14.88、6.48,P值均小于0.01),心肌细胞凋亡率均显著升高(t值分别为13.82、6.96,P值均小于0.01);与阴性转染+刺激组比较,转染+刺激组心肌细胞微小RNA-126表达明显升高(t=6.77,P＜0.01),心肌细胞活力明显升高(t=8.23,P＜0.001),心肌细胞凋亡率明显降低(t=6.14,P＜0.001).结论 大鼠严重烧伤早期心肌组织微小RNA-126表达下降,其可能参与烧伤早期心肌损害的调控并发挥保护作用.
