目的 探讨长链非编码RNA TMPO反义RNA1（LncRNA TMPO-AS1）调控miR-340-5p/RUNT相关转录因子1（RUNX1）轴对结直肠癌（CRC）细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、人CRC细胞SW480、HCT116、LOVO、HT-29中TMPO-AS1、miR-340-5p、RUNX1表达；将HCT116细胞随机分为：si-ctrl组、si-TMPO-AS1组、mimics NC组、miR-340-5p组、si-TMPO-AS1+anti-miR-ctrl组、si-TMPO-AS1+anti-miR-340-5p组；qRT-PCR检测6组HCT116细胞TMPO-AS1、miR-340-5p、RUNX1水平；CCK-8法检测HCT116细胞活力；EDU法检测HCT116细胞增殖；Transwell检测HCT116细胞迁移和侵袭；western blot检测HCT116细胞RUNX1、PCNA、MMP-2表达；双荧光素酶报告基因实验分别验证TMPO-AS1和miR-340-5p、miR-340-5p和RUNX1的关系。结果 与HCoEpiC细胞比较，不同CRC细胞中TMPO-AS1、RUNX1表达显著性升高，miR-424-5p表达显著性降低（P＜0.05）,且HCT116细胞变化结果更显著，后续实验选择HCT116细胞。与si-ctrl组比较，si-TMPO-AS1组HCT116细胞TMPO-AS1、RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性降低，miR-340-5p mRNA水平显著性升高（P＜0.05）;与mimics NC组比较，miR-340-5p组HCT116细胞RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性降低，miR-340-5p mRNA水平显著性升高（P＜0.05）;与si-TMPO-AS1+anti-miR-ctrl组比较，si-TMPO-AS1+anti-miR-340-5p组HCT116细胞RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性升高，miR-340-5p mRNA水平显著性降低（P＜0.05）;TMPO-AS1靶向负调控miR-340-5p表达，miR-340-5p靶向负调控RUNX1表达。结论 沉默TMPO-AS1靶向上调miR-340-5p表达，从而下调RUNX1表达，抑制HCT116细胞增殖、迁移和侵袭。